Structura si
functiile traductorilor
Traductorii trebuie sa converteasca in marimi electrice parametri generali
ca: entalpia de reactie (termistorul), modificari ale masei depuse (cristal
piezoelectric), grosimi ale unor straturi transparente (dispozitive
optoelectronice), concentratii de substante sau ioni (traductoare ISE).
1. Traductori
termici
La senzorii de metabolism exista
reactii chimice intre analiti si anumiti receptori enzimatici cu degajare / absorbtie de caldura. In acest caz nu se
masoara cantitatea analitului, ci variatia de temperatura, DT. Tabelul 10.1 prezinta
entalpiile molare, DH, a catorva reactii catalizate
de enzime.
Tabelul 10.1. Entalpiile
molare a catorva reactii catalizate de enzime.
Enzima receptor
|
Analit
|
-DH
(kJ/mol)
|
Catalaza
|
H2O2
|
100.4
|
Cholesterol-oxidaza
(COD)
|
Cholesterol
|
52.9
|
Glucoz-oxidaza
(GOD)
|
Glucoza
|
80
|
Ureaza
|
Uree
|
6.6
|
Enzima-receptor se imobilizeaza pe sticla poroasa pe suprafata unui
termistor. Se imerseaza totul in solutia de masurat. Termistorul joaca rolul
traductorului si furnizeaza DT. De aici
rezulta numarul de moli de analit, conform relatiei:
(10.1)
unde ν este numarul de
moli de analit, C este caldura molara a dispozitivului (ce se determina
anterior prin masuratori calorimetrice). Dezavantajul principal este schimbul
de caldura ce apare intre diversele componente ale experimentului, ceea ce va
induce erori mari in evaluarea lui DT. Optimizarile vizeaza izolarea calorimetrica a
biosenzorului intr-un reactor.
2. Traductori
optoelectronici
Cu ajutorul traductorilor
optici se poate indica variatia unor parametri precum: coeficient de absorbtie
a luminii, lungime de unda, indice de refractie, grosimi ale unor straturi
transparente. Ca exemplu, in figura 10.3, este prezentat principiul de
detectare a albuminei serice cu un senzor optoelectronic, [2].
Fig. Principiul de detectare a albuminei serice cu un senzor optoelectronic.
Receptorul a fost imobilizat pe o membrana de bromocresol transparent.
Curgerea biolichidului purtator de albumina a determinat captarea ei pe
receptori. Cresterea grosimii stratului de analit se face intre o sursa de
lumina (led) si un detector de lumina
(fotodioda). Curentul prin fotodioda scade pe masura ce creste grosimea
stratului de albumina depus pe receptor.
3. Traductori
piezoelectrici
Principiul pe care se lucreaza
aici urmareste scaderea frecventei de rezonanta a unui cristal piezoelectric cand se
absoarbe un material strain la suprafata sa si-l comprima, [71]. Cristalul este acoperit cu un material receptor.
Efectele zgomotului electric au putut fi inlaturate prin utilizarea de cristale
pereche. Acesti traductori au fost utilizati pentru detectarea: NOx,
COx, H+, microorganisme, [2].
4. Traductori
electrochimici
Reactiile electrochimice se produc la interfata
electrod - solutie, iar reactiile biologice cu transfer de electroni se produc
la interfata enzima - solutie. Se utilizeaza potentiometria, cand se determina variatia potentialului electric al
unui electrod receptor in functie de concentratia ionilor de analit dintr-o
solutie. Metoda traditionala
de detectie a unor ioni intr-o substanta purtatoare foloseste ISE (Ion Selective Electrodes). Din punct de
vedere electronic ISE poate fi privita ca o sursa de tensiune electromotoare
(de sute de milivolti pentru biosenzori) si cu o impedanta de iesire mare (pana
la sute de MW), [72]. Masa electrica este solutia, iar
iesirea sursei este electrodul de referinta. Daca concentratia ionilor de
analit din solutie se modifica, atunci potentialul electrodului sensibil la
acesti ioni (receptorul) se modifica dupa relatia
lui Nerst, (9.8). Spre exemplu, in cazul pH-ului (concentratia ionilor de H+), o
scadere a acestuia cu o unitate, determina cresterea tensiunii furnizate cu circa
55mV, [72].
Multi biosenzori electrochimici folosesc amperometria. In acest caz au loc reactii chimice de oxido-reducere
cu transfer de electroni in medii electrolitice. In domeniul biosenzorilor,
aceasta tehnica a insemnat detectarea unui analit prin masurarea concentratiei unui
produs de metabolism, mult mai usor de determinat. Pentru aceasta se folosesc
electrozi cu enzime receptor asezate in unul sau mai multe straturi. Pentru
masurarea concentratiei de glucoza se foloseste enzima GOD care accelereaza
foarte mult procesul de oxidare al glucozei, in urma caruia rezulta si H2O2.
Este mult mai usor sa se masoara concentratia de H2O2,
dupa care se calculeaza din reactie concentratia de glucoza. Curentii care se
stabilesc in aceste straturi sunt de natura unor curenti de difuzie, [2].
Curentul, Ilim este proportional cu concentratia substantei care se
determina mai usor, ci, (i=H2O2, in exemplul
anterior cu glucoza), conform modelului (9.14), (9.15).
5. Traductori
biologic intacti
Pentru determinarea unui analit,
aceste traductoare folosesc chemoreceptori
direct din lumea vie. Spre exemplu, s-a realizat un
receptor de acetilcolina, utilizand organul electric al pestelui Torpedo si un
senzor capacitiv, [2]. Cand biolichidul purtator continea acetilcolina in
concentratie marita, crestea tensiunea electrica furnizata de traductorul
organic al pestelui, ceea ce incarca senzorul
capacitiv. S-au putut face
masuratori in domeniul 1.100mmol/l concentratie de acetilcolina in biolichidul
purtator prin tehnici de C-V-metrie.
Alta directie de lucru este cuplarea unor celule receptoare vii cu una sau
mai multe fibre nervoase. Stimularea unor celule olfactive sau gustative cu un
anumit analit conduce la generarea unui impuls nervos detectabil catre neuronii
din fibra.
Ca exemplu, s-a realizat un senzor pentru determinarea concentratiei de
aminoacizi, utilizand drept traductor organul olfactiv din antenulele crabului
Calinectes Sadipus. Antenulele, legate de o unica fibra nervoasa, au fost
conectate cu o sonda de platina. Stimularea receptorilor olfactivi cu
aminoacidul L-glutamat, in concentratia 0,011mmol/l, a creat impulsuri
nervoase masurabile, cu valori cuprinse intre 10-1000mV. In plus, s-a obtinut o linearitate buna
in aceasta gama de masura, [2].
Observatie: Au fost amintite si exemplificate o serie de
substante ca: acetilcolina, dopamina, ioni de Na+, Ca+, K+.
Ele participa ca neurotransmitatori la propagarea impulsului nervos. De
retinut, ca transmiterea unui impuls nervos se face pur electric: prin
deplasare de sarcina electrica. Datorita acestei comportari
'electronice' a sistemului nervos uman, s-a dezvoltat o ramura noua
in stiintele biologice: neuroelectrofiziologia,
[2].